微生物質(zhì)譜鑒定的工作原理是將微生物具有種屬特異性的核糖體蛋白建立質(zhì)譜指紋數(shù)據(jù)庫(kù),通過(guò)采集未知菌的圖譜與數(shù)據(jù)庫(kù)的譜圖進(jìn)行比對(duì),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物的種類(lèi)鑒定,具有快、準(zhǔn)、穩(wěn)、省的優(yōu)點(diǎn)。
目前,致病菌識(shí)別鑒定技術(shù)主要有傳統(tǒng)的生化方法、基于DNA的擴(kuò)增、雜交方法、基于蛋白和多糖的免疫學(xué)方法,生化方法一直被認(rèn)為是鑒定菌株的金標(biāo)準(zhǔn),但是任何一株菌都需要多項(xiàng)生化反應(yīng)結(jié)果相互驗(yàn)證才能最終完成鑒定,即使現(xiàn)在的全自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)鑒定菌株最少也需要4~5h,且全自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)并不能覆蓋鑒定工作中的所有微生物。
一、那么微生物質(zhì)譜鑒定是如何實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物進(jìn)行檢測(cè)的呢?
它是通過(guò)檢測(cè)待測(cè)微生物核糖體蛋白的肽質(zhì)量指紋圖譜,并且將檢測(cè)到的圖譜與數(shù)據(jù)庫(kù)中的微生物標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行匹配檢索,從而完成微生物鑒定的。
二、有哪些優(yōu)勢(shì)?
相對(duì)于傳統(tǒng)鑒定方法,基于質(zhì)譜的微生物鑒定方法具有鑒定速度快、通量高、準(zhǔn)確性高、操作簡(jiǎn)單及成本低廉等顯著優(yōu)勢(shì)。
三、對(duì)樣本的要求:
待檢樣本必須是經(jīng)培養(yǎng)基分離后的純化菌落。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常使用商品化培養(yǎng)基,包含哥倫比亞血瓊脂、沙保氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等。為了滿(mǎn)足鑒定準(zhǔn)確性的要求,須采用如表所示時(shí)間新鮮培養(yǎng)的菌株。